可见分光光度计是化学分析、环境监测、生物医药等领域实验室常用的分析仪器之一。其原理是利用物质对可见光的选择性吸收来进行定量和定性分析。仪器的性能状态和操作规范性直接决定了分析结果的准确性和可靠性。下面将围绕正确校准、比色皿规范使用和日常维护保养三大核心环节，提供一份详细的操作指南，帮助您确保仪器始终处于理想工作状态。
一、正确校准：确保数据准确的基石
校准是消除系统误差、保证测量结果准确性的首要步骤。可见分光光度计的校准主要包括基线校准（透光率100%/吸光度0）和波长准确性检查。
1、开机预热：
接通电源，打开仪器开关，预热15-30分钟。预热能使仪器内部光源和电子元件达到稳定状态，是获得稳定读数的前提。
2、基线校准（调零/调100%T）：
选择波长：将仪器设定到所需的测量波长。
放入参比溶液：将盛有参比溶液（通常是空白溶液，即除待测物质外，包含所有试剂的溶液）的比色皿放入样品室。确保比色皿透光面清洁、无指印，且光路通过比色皿中心。
3、关闭样品室盖：盖紧样品室盖，避免杂散光进入。
调零/调100%T：按下“调零”或“100%T”按钮，使仪器显示透光率为100%（吸光度为0）。这一步的目的是扣除参比溶液和比色皿本身对光的吸收和反射，建立测量的基准线。
注意：每次更换测量波长或长时间测量后，都应重新进行基线校准。
4、波长准确性检查（定期进行）：
使用标准物质（如钬玻璃滤光片、镨钕滤光片或特定溶液）来检查仪器波长的准确性。
将标准物质放入光路，扫描其吸收光谱或测量特定波长下的吸光度，与标准值进行比对。如果偏差超出允许范围（通常±2nm），需由专业人员进行波长校准。
二、比色皿使用规范：避免误差的关键细节
比色皿是盛放样品和参比溶液的核心部件，其使用和清洁的规范性对结果影响极大。
1、比色皿的拿取与放置：
正确拿取：手持比色皿的磨砂面，严禁触碰透光面（两面光滑透明的面）。手指上的油脂和汗液会严重影响透光率，导致测量误差。
方向一致：比色皿放入样品室时，应确保其方向一致（通常有标记的一面朝向同一侧）。因为不同比色皿之间或同一比色皿不同方向的透光特性可能存在微小差异。
光路对准：确保比色皿位于光路的中心位置。
2、比色皿的清洗与维护：
及时清洗：每次使用后，应立即用蒸馏水或去离子水冲洗比色皿。如果盛放过有色溶液或难以清洗的样品，可用合适的溶剂（如乙醇、稀酸、稀碱）浸泡清洗，然后用蒸馏水冲洗干净。
避免划伤：清洗时使用软布或专用比色皿刷，避免使用硬物刮擦，防止划伤透光面。
干燥保存：清洗后，倒置晾干或用吹风机冷风吹干，放入专用的比色皿盒中保存，防止灰尘污染。
3、比色皿的匹配性检查：
对于精确测量，建议使用匹配的比色皿。检查方法：在所有比色皿中装入蒸馏水，在同一波长下测量其吸光度。吸光度差值应小于0.005。如果差异较大，应标记并避免在同一组实验中使用。
三、日常维护保养：延长仪器寿命的保障
定期的维护保养能有效延长仪器的使用寿命，并保持其性能稳定。
1、环境控制：
防尘防潮：仪器应放置在干燥、清洁、无腐蚀性气体的环境中。长期不用时，应盖上防尘罩。潮湿环境容易导致光学元件发霉、电路短路。
避免振动：仪器应放置在稳固、无振动的工作台上，避免强烈振动影响光学系统的稳定性。
2、光学系统维护：
样品室清洁：定期清洁样品室内部，用软布或擦镜纸轻轻擦拭，去除灰尘和样品残留。避免溶剂流入样品室内部。
光源更换：钨灯或卤钨灯是可见分光光度计的常用光源，有使用寿命。当发现光源亮度明显下降、基线噪声增大或无法调零时，可能需要更换光源。更换时需注意型号匹配，并避免用手直接触碰灯泡玻璃。
3、电气系统维护：
稳定电源：确保仪器使用稳定的电源，避免电压波动过大。
定期开机：即使不经常使用，也建议每周开机预热运行一段时间，以驱除潮气，保持电子元件的活性。
4、记录与核查：
建立仪器使用和维护记录，记录每次校准、维护和故障情况。
定期使用标准溶液（如重铬酸钾溶液）检查仪器的吸光度准确性和线性范围，确保仪器性能符合要求。
可见分光光度计的操作看似简单，但每一个细节都关乎数据的质量。通过规范化的校准流程、对比色皿的精心呵护以及定期的维护保养，我们不仅能获得准确可靠的分析结果，更能延长仪器的使用寿命，保障实验室工作的顺利进行。记住，良好的操作习惯是仪器理想性能的保障。
